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Kinesin家族蛋白是细胞内运输的主要执行者,它们利用ATP水解产生的能量,在微管上进行定向运动,运输细胞器和分子货物。Kinesin家族包含多个亚家族,根据其氨基酸序列和结构差异被分为14个不同的类别,即Kinesin-1至Kinesin-14 。这些蛋白在细胞中扮演着多种角色,包括但不限于:细胞器和分子货物的运输;细胞分裂过程中的染色体分离;微管网络的动态调控;纤毛和鞭毛的形成与功能。
图1 Kinesin家族分类
KIF18A(Kinesin Family Member 18A)是一种属于Kinesin家族的蛋白质,是Kinesin-3亚家族的成员,具有典型的Kinesin结构,包括一个重链和一个轻链,重链包含一个运动头部和一个尾部,尾部通常与细胞内的货物结合。它在细胞分裂过程中发挥着重要作用,特别是在有丝分裂期间帮助染色体的正确聚集和对齐。KIF18A的功能在正常的整倍体细胞分裂中并非必需,但在具有高染色体不稳定性的非整倍体癌细胞亚群中却是必需的。在这些癌细胞中,KIF18A的敲低会导致有丝分裂停滞、细胞停滞和细胞死亡,因此KIF18A是一个有吸引力的抗癌靶点。
图2 KIF18A蛋白结构域组成
一、产品及服务
1. Kinesin蛋白库:
人源MCAK (KIF2C) 蛋白,人源KHC (KIF5A) 蛋白,人源KIF7蛋白,人源CENP-E (KIF10) 蛋白,人源Eg5 (KIF11) 蛋白,人源KIF18A蛋白,人源KIF18B 蛋白,人源KIF19A蛋白,人源MKLP2 (KIF20A) 蛋白,人源KIF22 蛋白,人源MKLP1 (KIF23) 蛋白。
2. 抑制剂筛选:ADP-Glo实验。
二、实验原理
Kinesin ATPase实验原理见图3, Kinesin沿着微管蛋白运动需要消耗ATP转化成ADP,使用ADP-Glo试剂盒检测ADP的生成量来反应Kinesin ATPase酶活,加入ADP-Glo试剂盒中的ADP-Glo Reagent可以将实验中未反应的ATP全部清除,加入ADP-Glo试剂盒中的ADP-Glo Detection会将实验中产生的ADP转化为ATP,并且里面含有荧光素酶的底物,最后使用酶标仪的化学发光模块检测信号值。
图3 Kinesin ATPase实验原理
三、数据展示
1.蛋白SDS-PAGE胶图
2.Kinesin 家族选择性实验数据展示
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